甘薯遗传转化

甘薯遗传转化体系成熟主要采用发根农杆菌介导毛状根法和根癌农杆菌不定芽法茎段注射法无需组培、转化效率38.1%适用于抗旱、抗虫育种。主流方法比较方法 外植体 优点 缺点 效率茎段注射法RAPID 茎段 无组培、快速8–10周 新生器官筛选 38.1%​发根农杆菌毛状根 茎段/叶柄 高通量、AGL1菌株优 根系表达为主 79.63%​不定芽法 块茎/叶片 稳定整株 基因型依赖 5–20%​典型茎段注射法RAPID材料健康茎段含节切口浸入农杆菌液AGL1株OD600 0.6–0.8。注射向上注射至液从切口渗出移土培1周不定根萌发GUS快速检测阳性。再生阳性块茎/侧芽无性繁殖得T0植株TAIL-PCR定位插入位点。毛状根法优化徐薯22MSU440菌株茎段外植体20 min侵染毛状根诱导率79.63%PCR检rolB基因整合转基因率38.1%。​关键策略基因型筛选徐薯22、泰中6号L-Cys防褐化CRISPR载体验证抗旱P5CS基因支持工厂化育种。