产品概述本产品为艾美捷Bethyl Laboratories推出的针对人源BRD9蛋白Bromodomain Containing 9的兔多克隆抗体货号A303-781A。抗体以未标记的完整IgG形式提供适用于免疫沉淀IP和蛋白质印迹WB应用。该抗体经抗原亲和纯化特异性识别BRD9蛋白C端区域第547-597位氨基酸残基之间的表位可用于检测人源细胞中BRD9的表达水平、染色质重塑复合物组分分析及同源重组相关研究。核心参数参数 详细信息靶标 BRD9反应种属 人宿主 兔克隆性 多克隆形式 完整IgG免疫原区域 第547位至C端具体为第547-597位氨基酸参考序列NP_076413.3同型 IgG偶联物 未偶联纯度 抗原亲和纯化浓度 1000 µg/ml保存条件 2 8 °C有效期 收货后1年缓冲液 Tris-柠檬酸盐/磷酸盐缓冲液pH 7-8含0.09%叠氮化钠制备与纯化本抗体采用固相固定化技术使用特异性针对BRD9蛋白的表位进行亲和纯化。具体而言识别表位定位于人源含溴结构域蛋白9BRD9的第547至597位氨基酸区域基于GeneID 65980序列编号NP_076413.3该区域靠近蛋白C端。免疫球蛋白浓度通过比尔定律测定设定1 mg/mL IgG在A280波长的吸光度为1.4。应用与推荐稀释度蛋白质印迹Western Blot, WB推荐稀释度1:2000 1:10,000操作规范所有WB实验均使用5% Milk-TBST作为封闭液和抗体稀释液一抗孵育条件过夜孵育细胞裂解液的WB检测使用山羊抗兔IgG重链和轻链抗体货号A120-101P免疫沉淀物的WB检测使用HRP标记的抗兔IgG轻链抗体并在封闭缓冲液中添加5%正常猪血清货号S100-020免疫沉淀Immunoprecipitation, IP推荐用量6 µg抗体 / mg裂解液蛋白特异性与灵敏度本抗体经亲和纯化特异识别BRD9蛋白C端区域第547-597位。该表位远离N端的溴结构域避免了与其它含溴结构域家族蛋白如BRD2、BRD3、BRD4、BRD7等的交叉反应提高了检测的特异性。由于为多克隆抗体可识别目标抗原上的多个表位具有较高的检测灵敏度适用于低丰度蛋白的检测。工作浓度优势WB推荐稀释范围宽1:2000-1:10,000便于用户根据样本表达量和检测体系进行灵活优化。IP推荐用量明确6 µg/mg裂解液降低了预实验摸索的工作量。储存稳定性在2-8°C条件下可稳定保存1年自收货之日起。缓冲液中含0.09%叠氮化钠作为防腐剂注意叠氮化物会抑制过氧化物酶活性若计划进行HRP偶联二抗检测需在实验前通过透析或脱盐柱去除。别名bromodomain-containing protein 9; LAVS3040; PRO9856; rhabdomyosarcoma antigen MU-RMS-40.8; sarcoma antigen NY-SAR-29使用注意事项1. 叠氮化物干扰缓冲液中含有0.09%叠氮化钠。若下游实验使用HRP偶联二抗进行检测需注意叠氮化物会抑制HRP活性。建议在进行WB或ELISA检测前通过PBS透析或使用脱盐柱去除叠氮化物。2. 抗体分装虽然产品在2-8°C条件下稳定但若需长期保存或避免反复取用可考虑分装后保存于-20°C或-80°C。注意避免反复冻融以免降低抗体活性。3. 阳性对照建议建议使用高表达BRD9的细胞系如HeLa、HEK293、HCT116等裂解液作为WB阳性对照。同时设置无抗体对照或同型对照用于IP实验以排除非特异性结合。4. 应用验证范围本产品已在IP和WB应用中得到验证但不保证在其他应用如免疫荧光、免疫组化、ChIP等中的效果。如需拓展应用如ChIP-seq检测BRD9在染色质上的结合位点建议自行进行预实验优化条件。5. 实验参数优化推荐的WB稀释范围和IP用量为起始参考值。对于特定的样本类型如组织裂解液或核提取物可能需要进一步优化抗体浓度、封闭条件和孵育时间。